從中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)獲悉，該校生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)部陳宇星教授和周叢照教授課題組，利用單顆粒冷凍電鏡技術(shù)解析了一系列人類(lèi)膽汁酸外排蛋白ABCB11與其生理底物—牛磺膽酸鈉的復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)該蛋白內(nèi)部存在兩個(gè)串聯(lián)的底物結(jié)合口袋，借助一系列生化實(shí)驗(yàn)闡明了ABCB11特異性外排膽汁酸的分子機(jī)制。該研究成果日前在線(xiàn)發(fā)表在《細(xì)胞研究》上。
膽汁鹽是人體膽汁中最重要的兼性分子，有助于脂類(lèi)和脂溶性維生素的消化。此外，它還參與其他生物學(xué)過(guò)程，如葡萄糖代謝和免疫應(yīng)答等。膽汁鹽以膽固醇作為前體在肝細(xì)胞中合成，由ABCB11外排至膽小管中參與膽汁的形成。膽汁鹽的外排阻滯將導(dǎo)致一系列膽汁淤積相關(guān)疾病，如進(jìn)行性家族性肝內(nèi)膽汁淤積(PFIC)。PFIC多發(fā)于兒童，常伴隨肝腫大和肝硬化，最終因肝功能衰竭而致成年前死亡。
2020年，該研究組利用單顆粒冷凍電鏡技術(shù)解析了人類(lèi)ABCB11的無(wú)配基結(jié)構(gòu)。為了探究ABCB11轉(zhuǎn)運(yùn)生理底物的分子機(jī)制，研究組繼續(xù)解析了ABCB11在不同濃度牛磺膽酸鈉存在時(shí)的兩個(gè)復(fù)合物結(jié)構(gòu)：低濃度時(shí)結(jié)合一個(gè)牛磺膽酸鈉分子，高濃度時(shí)結(jié)合兩個(gè)牛磺膽酸鈉分子。結(jié)合ATP酶活性實(shí)驗(yàn)和底物轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)，闡明了兩個(gè)口袋具有明顯的底物親和力梯度，使得底物可以順親和力梯度依次結(jié)合兩個(gè)口袋，最終完成跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。這種沿著轉(zhuǎn)運(yùn)通道串聯(lián)排布的雙底物結(jié)合口袋結(jié)構(gòu)既保證了底物轉(zhuǎn)運(yùn)的高效性，又保證了底物識(shí)別的高特異性。因此，ABCB11是一類(lèi)全新的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白——整合了底物濃度梯度擴(kuò)散和ATP水解供能的主動(dòng)運(yùn)輸。
該研究成果不僅有助于人們深入理解膽汁酸的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，同時(shí)也為膽汁淤積癥等疾病的治療干預(yù)和藥物設(shè)計(jì)提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。(吳長(zhǎng)鋒)
